本发明涉及植物病理学，具体地涉及大丽轮枝菌弱毒菌株Vd171及其在棉花黄萎病防治中的应用。本发明从棉花黄萎病菌弱毒菌株入手，通过分离、筛选、鉴定、温室的生物测定，获得对棉花黄萎病具有显著控制作用的菌株Vd171（Verticilliumdahliae），其保藏编号为：CGMCC No. 5903。Vd171能够在人工培养基上培养，容易获得和培养，以利于工厂化生产和推广应用。对黄萎病控制效果好，先接种Vd171，4天后接种大丽轮枝菌强毒菌株Vd991，对棉花黄萎病的防治效果达到85.0%，对黄萎病有显著的控制作用，与生产上应用较多的枯草芽孢杆菌相比，防治效果提高50%左右，对人畜、昆虫和作物安全，环境友好。