专利信息

       本发明提供了一种棉花DNA纤维荧光原位杂交(Fiber-FISH)方法，该方法采用刀切法制备细胞核，引流法拉伸DNA纤维，分别以基因组和45S rDNA为探针进行DNA纤维荧光原位杂交。刀切法提取细胞核，在提取液中加入PVP40等酚类结合物质，并避免使用巯基乙醇等有害药品，成功率达到100％；引流法拉伸DNA纤维，避免了液体表面张力的影响，消除因载玻片推抹用力不均而导致DNA 纤维堆积和断裂，所制备的DNA纤维平直均匀完整；基因组DNA 和45S rDNA以缺刻平移法或随机引物法标记探针进行DNA纤维荧光原位杂交，获得清晰明亮的信号图像。